保證毛細(xì)管電泳儀有效分離的關(guān)鍵,使實(shí)驗(yàn)重復(fù)性達(dá)到應(yīng)用要求
毛細(xì)管電泳儀采用并行毛細(xì)管電泳(CE)與熒光檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合,能夠?qū)NA和RNA電泳分離檢測(cè)。毛細(xì)管列陣是并行毛細(xì)管電泳的基礎(chǔ),根據(jù)毛細(xì)管列陣的毛細(xì)管數(shù)量分為96和12通道,每個(gè)毛細(xì)管首先注入可導(dǎo)電的分離膠,然后對(duì)毛細(xì)管兩端施加電場(chǎng),96孔板中的預(yù)檢測(cè)樣品開(kāi)始毛細(xì)管電泳。依據(jù)核酸片段長(zhǎng)度不同在凝膠電泳中遷移速度不同的原理核酸樣品被分離檢測(cè)。當(dāng)毛細(xì)管中核酸片段通過(guò)位于LED和CCD探測(cè)器組件之間的檢測(cè)窗口時(shí)被實(shí)時(shí)檢測(cè)。核酸檢測(cè)組件是由一個(gè)LED光源(470納米激發(fā))、照相機(jī)鏡頭和CCD探測(cè)器組成的光學(xué)平臺(tái)。LED光源(470納米激發(fā))激發(fā)核酸樣品中的嵌入染料產(chǎn)生熒光信號(hào),然后通過(guò)相機(jī)鏡頭和特定的濾光器立體成像到CCD檢測(cè)器,把實(shí)時(shí)熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換為實(shí)時(shí)電信號(hào)被軟件實(shí)時(shí)讀取,由此測(cè)繪每個(gè)樣品完整的核酸片段分布峰圖。
毛細(xì)管電泳是一種在空芯的、極微小內(nèi)徑的毛細(xì)管中進(jìn)行的液-液相大、小分子的蛋白分離技術(shù)。
毛細(xì)管兩端分別浸入緩沖液中,而緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極,根據(jù)被分離物之間電荷和體積的不同,帶電荷分子朝相反極性的電極方向移動(dòng)。又利用毛細(xì)管內(nèi)壁上的電荷和應(yīng)用的勢(shì)能而引起的電解質(zhì)移動(dòng),毛細(xì)管內(nèi)表面帶有硅羥基基團(tuán),當(dāng)毛細(xì)管內(nèi)充滿(mǎn)緩沖溶液時(shí),毛細(xì)管壁上的硅羥基發(fā)生解離,生成氫離子溶解在溶液中,這樣就使毛細(xì)管壁上形成雙電層,管壁是負(fù)電荷層,溶液是正電荷層。
在毛細(xì)管的兩端加上直流電場(chǎng)后,帶正電的溶液就會(huì)整體向負(fù)移動(dòng),形成了電滲流。無(wú)論是帶正電、帶負(fù)電或不帶電的粒子,都在電滲流的作用下,向陰極遷移,帶正電的,受到同方向的電場(chǎng)力作用,遷移快,不帶電的遷移速度次之,帶負(fù)電的遷移速度慢,(因?yàn)樗艿脚c電滲流反方向的電場(chǎng)力作用),從而實(shí)現(xiàn)各蛋白組分的分離。
毛細(xì)管電泳儀的優(yōu)勢(shì)
1、毛細(xì)管電泳儀的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)*實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)原始管上樣,操作人員只需將帶有條形碼的原始管放在儀器試管架上,初始操作完畢后即可離開(kāi),毛細(xì)管電泳儀將自動(dòng)連續(xù)運(yùn)行樣品,無(wú)須人為干預(yù)。樣本經(jīng)儀器自動(dòng)稀釋后,由高精氣壓控制的納升級(jí)樣品進(jìn)樣系統(tǒng)將樣品地吸入毛細(xì)管內(nèi)部。
2、樣品溫控系統(tǒng)該高速電泳分離系統(tǒng)整合了一個(gè)高精度Peltier自動(dòng)溫控裝置,能夠?qū)γ?xì)管中產(chǎn)生的焦耳熱進(jìn)行實(shí)時(shí)穩(wěn)定的控制,是保證毛細(xì)管電泳儀有效分離的關(guān)鍵,使實(shí)驗(yàn)重復(fù)性達(dá)到應(yīng)用要求。
3、毛細(xì)管電泳儀可以進(jìn)行多種臨床項(xiàng)目的檢測(cè)。
4、毛細(xì)管電泳儀檢測(cè)結(jié)果*數(shù)據(jù)化、信息化管理利用互聯(lián)網(wǎng)技術(shù),實(shí)現(xiàn)各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的傳輸,包括曲線,工作流程和結(jié)果報(bào)告,并可建立實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)資庫(kù)。
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